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实验:小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察

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  一、实验目的:
  通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程及其意义。
  二、实验原理
  巨噬细胞起源于骨髓,经血液进入组织中而成,分布于全身各处。当机体受到某些损伤因素时(如微生物或其它病原体或异物侵入),能招引巨噬细胞,同时巨噬细胞有趋化性,主动向病原体或异物游走,在接触到病原体或异物时,细胞膜凹陷伸出伪足包围异物,并发生胞吞作用形成吞噬泡,继而细胞质中的溶酶体与吞噬泡融合,消化分解异物。
  含台盼蓝的淀粉肉汤,可使腹腔中有较多的吞噬细胞,以供观察吞噬活动。
  三、实验用品
  1、材料:小白鼠、1%鸡红细胞悬液、10%羊红细胞悬液。
  2、试剂:6%的淀粉肉汤(含台盼蓝),0.9%生理盐水。
  3、仪器设备:显微镜、注射器、注射针头、吸管、试管架、解剖刀、解剖镊、载玻片、盖玻片、记号笔。
  四、实验材料:
  1、小白鼠
  2、1%鸡红细胞悬液
  五、方法步骤
  取一只注射过淀粉肉汤的小白鼠,腹腔注射1%鸡红细胞悬液1ml,25分钟~30分钟后再向腹腔注射0.9%生理盐水1ml,并用手轻揉小鼠腹部,有利于悬液分散。3分钟后,用颈椎脱臼方法处死小鼠(一手捏着鼠头、颈连接处,一手捏住鼠尾,分别向两端用力牵拉,直到拉死为止),迅速剖开腹腔,用不带针头的注射器贴腹腔背壁处直接抽取腹腔液,滴片,制备一张临时装片,盖上盖玻片。放置2分钟~3分钟后在显微镜下观察。
  在高倍镜下,可见到圆形或形状不规则的巨噬细胞,其胞质中含有数量不等的蓝色颗粒(为吞入的含台盼蓝的淀粉肉汤形成的吞噬泡),还可见少量淡黄色椭圆形有核的鸡红细胞。慢慢移动玻片标本,仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程:有的鸡红细胞(一个至多个)紧贴于巨噬细胞表面;有的巨噬细胞已将一至数个鸡红细胞部分吞入;有的巨噬细胞已吞入了一个或几个红细胞,形成了椭圆形吞噬泡;有的巨噬细胞内的吞噬泡已与溶酶体融合正在被消化,体积缩小呈圆形。将所见到的处在不同吞噬阶段的巨噬细胞动态地联系起来,想一想吞噬作用的全过程。
  六、注意事项:
  剖开小鼠腹腔时,剪刀头要向上,以避免剪破腹腔血管,腹腔液应是无色的液体。
  七、作业:
  将所见到的处在不同吞噬阶段的巨噬细胞动态地联系起来,说一说吞噬作用的全过程。
  

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